Taq DNA Polymerase (Buffer含Mg2+)PCR相關
Taq DNA Polymerase 是從克隆有 Thermu aquaticus DNA Polymerase 基因的大腸桿菌經(jīng)誘導表后分離純化的,其分子量為94 KD。 Taq DNA Polymerase具有5′-3′DNA聚合酶活性和5′-3′外切核酸酶活性,無 3′-5′外切酶活性。Taq DNA Polymerase (Buffer含Mg2+)PCR相關
Taq DNA Polymerase (Buffer 含 Mg2+)
Taq DNA Polymerase (Buffer含Mg2+)PCR相關
目錄號:71011
產品內容
產品成份 | 71011-0500 | 71011-03000 |
Taq DNA Polymeras(5U/µl) | 500 U | 3000 U |
10× Taq Buffer+(with Mgcl2) | 1 ml | 6×1ml |
保存條件
-20℃保存,有效期 2 年。
經(jīng)常使用,可置于 4 °C 保存,有效期 3 個月。
產品簡介
Taq DNA Polymerase 是從克隆有 Thermu aquaticus DNA Polymerase 基因的大腸桿菌經(jīng)誘導表后分離純化的,其分子量為94 KD。 Taq DNA Polymerase具有5′-3′DNA聚合酶活性和5′-3′外切核酸酶活性,無 3′-5′外切酶活性。在PCR反應中,Taq DNA Polymerase 延伸速度為1-2 kb/ 分鐘,產物3′端帶A,可直接用于TA載體克?。–at#V114)。
活性單位:
1 單位(U)Taq DNA Polymerase 活性定義為在 74℃、30 分鐘內,
以活性化的大馬哈魚精子 DNA 作為模板引物,將 10 nmol 脫氧核苷酸摻入
到酸不溶物質所需的酶量。
質量控制:
SDS-PAGE 檢測純度大于 99%,經(jīng)檢測無外源核酸酶活性;PCR 方法 檢測無宿主殘余 DNA,能有效地擴增人基因組中的單拷貝基因;室溫存放一 周,無明顯活性改變。
酶貯存緩沖液:
20mM Tris-HCl (pH8.0),0.1 mM EDTA,1mM DTT,100 mM KCl,Stabilizers,50% glycerol。
10×Taq Buffer (含Mg2+):
200 mM Tris-HCl (pH 8.4),200 mM KCl, 100 mM(NH4)2 SO4,15 mM MgCl2,其他成分。
適用范圍:
一般用于DNA片斷的PCR擴增、DNA標記、引物延伸、序列測定、平末端加A等,產物可以直接用于TA載體克隆。
Taq DNA Polymerase 的使用說明:
一、配制 PCR 反應體系:(于冰上配制)
Component | 20 μl Reaction | 50 μl Reaction | 終濃度 |
Template DNA | as required | as required | 10pg-0.5μg |
Forward Primer (10 M) | 0.4 μl | 1 μ | 0.2 μM |
Reverse Primer (10 μM) | 0.4 μl | 1 μl | 0.2 μM |
10×Buffer+(withmgcl2) | 2 μl | 5 μ | 1 × |
dNTP Mixture(各2.5mM) | 1.6 μ | 4 μl | 0.2 μM |
Taq DNA polymerase(5U/μl) | 0.2-0.4 μl | 0.5-1 μl | |
ddH2O | up to 20 μl | up to 50 μ |
參考模板用量(50 μl 反應體系):
質粒:0.1-10 ng;細菌基因組:10-100 ng;人類基因組:50-150 ng;cDNA:1-5 μl from RT。
一、 設置 PCR 循環(huán)條件:(請根據(jù)實際情況適當調整)
Step | Temperature | Tim | Cycle Number |
Initialdenaturation | 94℃ | 3 minutes | |
Denaturation | 94℃ | 30 seconds | 30-35 cycles |
Annealing | 55℃ | 30 seconds | |
Extension | 72℃ | 1-2 kb / minute | |
Final Extension | 72℃ | 5 minutes | |
4-8℃ | Hold |
三、結果檢測:反應結束后取 5 µl 反應產物,瓊脂糖凝膠電泳檢測。
Taq DNA Polymerase (Buffer含Mg2+)PCR相關
北京諾博萊德科技有限公司始創(chuàng)于2012年,總部位于北京海淀區(qū),專注于科研生物領域,是一家研發(fā)、銷售和服務于一體的企業(yè)。公司秉承“誠信為本,博采眾長"的發(fā)展理念,致力于為科研工作者提供高質量的生物產品和服務。
諾博萊德的產品覆蓋面廣泛,包括以下
生化試劑:抗生素、蛋白質、染色劑、細胞培養(yǎng)基、緩沖試劑、對照品、標準品、磁珠、維生素、酶和輔酶、分離試劑、表面活性試劑、碳水化合物;
即用型試劑:常規(guī)試劑溶液、即用型染色液、免疫學試劑、細胞生物學、分子生物學、檢測試劑盒、細胞分離液人或其他動物細胞、熒光定量、蛋白酶系列;
通用耗材:超濾離心管、吸頭/盒、離心管/盒、封板膜、PCR耗材、濾紙、口罩手套、冷凍存管/盒、培養(yǎng)板/皿/瓶、酶標條/板、巴氏吸管、載玻片、蓋玻片、包埋/盒/模具、封片劑、刀片、石蠟、印跡膜、藍蓋瓶、研磨器材、透析袋/夾子、血凝板、記號筆、注射器、加樣槽、取樣杯、細胞篩網(wǎng)、細胞刮刀/鏟、單道多道手動自動移液器/支架、防卷板等產品被國內科研工作者廣泛應用。